|
Fenotipos y genotipos de resistencia a macrólidos-lincosamida de Staphylococcus aureus aislados en mamitis clínicas bovinas
Macrolide-lincosamide-resistant phenotypes and genotypes of Staphylococcus aureus isolated from bovine clinical mastitis
Vet Microb. 2008. Vol. 130: 1-2: 118-125
Y. Wang, C.M. Wu, L.M. Lu, G. W. N. Ren, X. Y. Cao, J. Z. Shen
El objetivo del trabajo que se describe a continuación era determinar la prevalencia y los mecanismos de resistencia cruzada frente a macrólidos y lincosamidas en 72 cepas de Staphylococcus aureus procedentes de vacas con mamitis clínica. Las concentraciones mínimas inhibitorias (CMI) de los diferentes antibióticos se determinaron mediante los siguientes métodos: microdilución en caldo, pruebas de difusión para determinar fenotipos resistentes y detección de los genes de resistencia por PCR.
Las cepas mostraron altos niveles de resistencia frente a eritromicina (93,1%), azitromicina (93,1%), espiramicina (41,7%), tilosina (40,3%), tilmicosina (27,8%) y clindamicina (36,1%). Los valores de la CMI90 fueron ≥128 mg/l. El fenotipo de resistencia inducida frente a estos antibióticos se detectó en el 52,8% de las cepas (38/72). Las cepas resistentes a la eritromicina presentaban genes de la metilasa (ermB y ermC), genes para inactivación de enzimas (lnuA y mphC) y genes de expulsión activa (mrsA/mrsB), solos o en combinación, prevaleciendo los primeros.
Se trata del primer trabajo en el que se determinan los genes de resistencia frente a macrolidos y lincosamidas en bacterias aisladas a partir de mamitis bovinas. Los elevados niveles de resistencia frente a estos antibióticos en las cepas de S. aureus y el elevado índice de fenotipos resistentes sugieren la necesidad de establecer una terapia antibiótica alternativa para tratar las mamitis provocadas por patógenos de esta especie.
Por otra parte, las diferencias observadas en la forma de los anillos de lactona para los macrólidos testados podría explicar porqué algunas cepas con resistencia fenotípica constitutiva macrólido-lincosamida sólo fueron sensibles a 16 macrólidos. La interacción entre estos antibióticos con la subunidad 50S ribosomal podría ser la razón por la que los resultados de susceptibilidad observados para la tilmicosina eran diferentes a los de la tilosina y la espiramicina.
|
  |
Efecto de la duración del periodo seco en la producción y salud del ganado lechero
Effects of dry period length on milk Production and health of dairy cattle
R. D. Watters, J. N. Guenther, A. E. Brickner, R. R. Rastani, P. M. Crump, P. W. Clark and R. R. Grummer
J. Dairy Sci. 2008. Vol 91:2595-2603.
Mediante la aplicación de dos procedimientos diferentes de secado, este trabajo pretendía comprobar de qué manera dichos procedimientos repercutían en la producción y calidad de la leche, en sus componentes, en la calidad del calostro y en la incidencia de problemas metabólicos.
Para ello se trabajó con 781 vacas Holstein repartidas al azar en dos grupos, a cada uno de los cuales se aplicó una de las dos estrategias de secado: tradicional (T; 55 días) y modificada con un periodo de secado más breve (M; 34 días).
Las vacas del grupo T recibieron una dieta baja en energía hasta 34 días antes de la fecha prevista de parto, desde este momento hasta el parto, se les administró una dieta de transición. Las vacas de este grupo fueron las que tuvieron una mayor producción y tendían a producir más sólidos en leche que las del grupo M. La grasa láctea fue similar en ambos grupos, sin embargo, la proteína obtuvo mejores resultados en el grupo M. En el caso de los ácidos grasos no esterificados, el grupo T mostró una tendencia a la reducción de sus concentraciones en el preparto, mientras durante el posparto estas concentraciones fueron menores en el grupo M.
Otros aspectos como la calidad del calostro, el número de células somáticas, la incidencia de cetosis, retención de placenta, desplazamiento de abomaso y metritis no mostraron diferencias entre los dos procedimientos de secado. El balance energético posparto, como sugerían los niveles plasmáticos de ácidos grasos no esterificados, podría mejorarse en las vacas del grupo con un periodo seco de 34 días. La salud de los animales no resultó afectada en ningún caso.
|
|
Respuesta de fase aguda en dos infecciones experimentales intramamarias con E. coli en vacas lecheras
Acute phase response in two consecutive experimentally induced E. coli intramammary infections in dairy cows.
L. Suojala, T. Orro, H. Járvinen, J. Saatsi, S. Pyörälä
Acta Vet Scand. 2008 Vol. 50(1):18
El objetivo de este estudio era conocer el comportamiento de los marcadores de fase aguda: haptoglobina, amiloide sérico A y proteína de unión al lipopolisacárido en el proceso de infección mamaria.
Para llevarlo a cabo se realizaron dos desafíos intramamarios consecutivos con Escherichia coli a 6 vacas (dosis de 1.500 ufc en un cuarterón y 14 días más tarde en otro) y se determinaron en suero y leche las concentraciones de los marcadores de fase aguda.
Todas las vacas se infectaron y desarrollaron la mamitis clínica a las 12 horas del desafío. La enfermedad y la respuesta de fase aguda fueron, generalmente, más leves con la segunda inoculación. Las concentraciones de amiloide A en leche comenzaron a incrementarse a las 12 horas de la inoculación, mostrando un pico máximo a las 60 horas tras el primer desafío y a las 44 horas del segundo, la evolución de este marcador en suero fue más lenta, los niveles alcanzados fueron inferiores (un tercio de los obtenidos en leche) y los picos de concentración sucedieron en tiempos semejantes. La concentración de haptoglobina en leche aumento hasta su máximo a las 36-44 horas, mientras en suero se alcanzó más tarde (60-68 horas), aunque el valor alcanzado doblaba el observado en leche. En el caso del la proteína de unión al lipopolisacárido, sus niveles en leche y suero comenzaron a crecer a partir de las 12 horas posinoculación y tuvieron su pico máximo a las 36 horas (la concentración fue mayor en leche).
Las concentraciones de estos marcadores en leche y suero con la inoculación de E. coli fueron considerablemente más altas que las obtenidas en otros estudios realizados con gérmenes Gram positivos lo que sugiere según los autores la gravedad de la inflamación inducida por este patógeno.
A partir de los resultados obtenidos, se concluye que las proteínas de fase aguda podrían considerarse indicadores de mamitis y de la gravedad de la infección. Los autores aconsejan retrasar el segundo desafío con el patógeno más de 2 semanas para evitar los efectos de la primera infección (estado de portadores).
|
|
Caracterización de una lisina de bacteriófago (ply700) en la especie Streptococcus uberis
Characterization of a bacteriophage lysin (ply700) from Streptococcus uberis
L. K. Celia, D. Nelson, D. E. Kerr
Vet Microb. 2008, Vol.130 (1-2): 107-117
El objetivo de este estudio era comprobar los efectos de una lisina recombinante obtenida a partir del aislamiento y secuenciación de un profago de la cepa de Streptococcus uberis (ATCC 700407). Dicha lisina, de secuencia similar a otras lisinas fágicas, se purificó mediante cromatografía (Ply700) y se incorporó en suspensiones bacterianas de S. uberis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, y E. coli.
En las suspensiones de las tres primeras especies la adición de Ply700 provocó rápidamente la lisis de las bacterias dependiente del calcio, mientras apenas se observaron efectos en las tres últimas (S. agalactiae, S. aureus, y E. coli).
La eliminación de S. uberis en la leche por la lisina estudiada a una concentración de 50 μg/ml se confirmó mediante recuentos en placa. La destrucción del patógeno fue superior (81%; P<0,01) cuando la dosis de inóculo bacteriano fue de 600 ufc/ml; dosis mayores como la inicial (4.500 ufc/ml) obtuvieron peores resultados con sólo una eliminación del 31% (P<0,05). La realización de la prueba en un medio salino en lugar de leche obtuvo resultados llamativos, ya que se consiguió la esterilización total del medio. Este hecho podría indicar que en la leche podrían estar presentes factores neutralizantes del efecto de la lisina.
La caracterización funcional del dominio terminal-C, reveló su habilidad calcio-dependiente para unirse a S.uberis. En consecuencia, podría servir para identificar este patógeno. Queda por determinar si la lisina por sí misma es suficientemente efectiva para controlar las mamitis provocadas por S. uberis.
|
|
Preparación del pezón preordeño en vacas australianas en sistemas extensivos con equipos de ordeño automático
Premilking Teat Preparation for Australian Pasture-Based Cows Milked by an Automated Milking System
K. L. Davis, W. J. Fulkerson, S. C. Garcia, D. Dickeson and I. M. Barchia
J. Dairy Sci. 2008. 91:2604-2609
Ante los procedimientos que aplican algunas explotaciones australianas en las que la limpieza de pezón se realiza sólo sobre áreas sucias, se realizó el siguiente estudio con 80 vacas en lactación durante dos periodos de 5 semanas cada uno, para conocer de qué manera afectaba la limpieza del pezón a la producción de leche y al tiempo total de ordeño (tiempo que pasan en la unidad de ordeño).
Los resultados no evidenciaron diferencias significativas en los valores de conductividad, concentración de sangre en leche o en los recuentos de células somáticas. La producción de leche diaria tampoco mostró diferencias importantes entre ambos procedimientos. Por el contrario, las diferencias fueron manifiestas en la tasa media de flujo de leche por cuarterón, siendo mayor cuando se realizaba la preparación del pezón (981 frente a 950 g ± 13 g de leche/min. Sin embargo, esta diferencia no era suficiente para compensar el tiempo invertido en la limpieza del pezón que incrementaba el tiempo total de ordeño en 1,10 ± 0,08 min por ordeño y en consecuencia, resultaba en una menor tasa de producción (2,08 kg de leche/min cuando no se preparaba el pezón frente a 1,74).
Los autores subrayan la ventaja económica que supone no aplicar un procedimiento de limpieza al pezón, ya que permite una utilización más eficiente de la unidad de ordeño (más vacas ordeñadas por unidad). No obstante, sugieren la necesidad de realizar un estudio a más largo plazo, en el que se investigue el efecto de los procedimientos de preparación de los pezones en la salud de la ubre y en la calidad de la leche.
|
|
Mejora genética de la producción total de leche y de la persistencia en lactación de las tres primeras lactaciones en vacuno lechero
Genetic Improvement of Total Milk Yield and Total Lactation Persistency of the First Three Lactations in Dairy Cattle
K. Togashi and C. Y. Lin
J. Dairy Sci. 2008. 91:2836-2843
El objetivo de este trabajo era comparar 6 criterios de selección considerando la producción láctea de las tres primeras lactaciones: valores reproductivos estimados para la primera, segunda y tercera lactación (M1, M2 y M3) e índices Eigen para estas lactaciones (IE1, IE2 e IE3). También se compararon 9 criterios de selección que tenían en cuenta el mérito total neto (H) que incluye la producción total de leche en las tres primeras lactaciones, la persistencia de estos periodos y la prolificidad en los tres primeros partos: M1, M2, M3, IE1, IE2, IE3, I1, I2 e I3, respectivamente.
Considerando la producción láctea total, los criterios M3 o IE3 fueron los que consiguieron la mayor respuesta genética, mientras la selección del criterio IE3 obtenía el mayor progreso genético por día. Si el parámetro valorado era el mérito total neto, el criterio I3 era el que obtenía la mejor respuesta genética y IE1 el mayor progreso genético por día.
Los autores sugieren que utilizar el valor reproductivo estimado para las tres primeras lactaciones es más indicado que utilizar el valor reproductivo estimado para la primera lactación exclusivamente, ya que éste último tiene un progreso genético más rápido por día y puesto que la selección de M3 no aumenta el intervalo generacional, está justificado comparar la respuesta genética en base a un periodo de tiempo más prolongado.
Los autores concluyen, de acuerdo con los resultados obtenidos, que M3 o IE3 para conseguir la mejora genética en la producción total de leche, así como I3 para la mejora genética del merito total neto. No obstante, aunque este estudio hace referencia a la selección en base a la producción láctea de las tres primeras lactaciones, los autores consideran que lo más indicado es tener en cuenta dicha producción durante toda la vida del animal.
|
|
Identificación de cepas enterotoxigénicas de Staphylococcus aureus en leche de tanque mediante las técnicas de PCR múltiple y RPLA
Multiplex PCR and RPLA Identification of Staphylococcus aureus Enterotoxigenic Strains From Bulk Tank Milk
M. Zouharova and D. Rysanek
Zoonoses and Public Health, 2008. Vol. 55 (6): 313-319
La presencia de Staphylococcus aureus en la leche cruda supone un riesgo potencial para los consumidores, por esta razón, el objetivo principal de este trabajo era comprobar la presencia de cepas enterotoxigénicas de S. aureus en la leche cruda procesada en las industrias lácteas de la República Checoslovaca y, adicionalmente, comparar la producción de enterotoxinas estafilocócicas con la presencia de sus genes correspondientes.
Mediante las técnicas de PCR y aglutinación reversa pasiva en látex (RPLA) se obtuvieron los siguientes resultados: de 440 muestras procedentes del tanque de leche cruda, 70 eran positivas al patógeno S. aureus (15,9%); en 39 de las cepas (55,7%) se detectaron genes para la enterotoxina estafilocócica. Los genes detectados con mayor frecuencia fueron sei (38,6%), seg (31,4%), y sea (27,1%) y los genotipos más abundantes coincidían con éstos genes: genotipo seg, sei (11,4%); sea (10,0%); y sea, seg y sei (8,6%). La producción de la toxina se observó en 9 de las cepas de S. aureus aisladas (12,9%): siete cepas se identificaron como productoras SEB- (10%) y dos como SED- (2,9%).
En cuanto a las técnicas aplicadas, se detectó un número relativamente alto de discrepancias (32%) entre ambas, especialmente cuando se trataba del genotipo sea: 19 cepas eran positivas a este gen según la técnica de PCR, mientras que según la técnica RPLA eran negativas, y una cepa obtuvo resultados contradictorios para el gen sec. Para los genes seb y sed no se detectaron discordancias.
De acuerdo con los resultados obtenidos los autores concluyen que la detección de los genes de enterotoxinas estafilocócicas puede contribuir a la identificación de las diferentes cepas enterotoxigénicas de S. aureus.
|
|
Identificación de estafilococos coagulasa negativos en mamitis bovinas mediante las técnicas de RFPL-PCR para el gen groEL
Identification of coagulase-negative staphylococci from bovine mastitis using RFLP-PCR of the groEL gene
O. C. da Silva, Elaine Menezes, M. A. Vasconcelos, M. C. de Freire, K. R. Netto, M. Giambiagi-deMarval
Vet Microb. 2008. Vol. 130 (1-2): 134-140
La dificultad que constituye para los laboratorios de diagnóstico la identificación de patógenos coagulasa negativos con las herramientas actuales es el motivo que ha animado a los autores de este artículo a comparar los resultados obtenidos en la técnica de PCR y los polimorfismos en la longitud de los fragmentos de restricción (PLFR) para el gen groEL con los de la técnica convencional para la identificación de patógenos estafilocócicos implicados en las mamitis bovinas.
Se trabajó con 54 cepas de estafilococos implicados en mamitis bovinas. Los tamaños de los fragmentos obtenidos por las técnicas de digestión enzimática Alul o HindIII/Pvull permitieron establecer patrones claros de diferenciación entre las diferentes cepas. Un gran número de dichas cepas se correspondían con la especie de referencia Staphylococcus chromogenes (n=28) y con la especie Staphylococcus epidermidis (n=8). También se detectaron cepas correspondientes a Staphylococcus aureus (n=5).
Todos los patrones de PCR-PLFR se confirmaron con los métodos convencionales, lo que indica, según los autores, que la técnica utilizada para el gen groEL puede constituir un método fiable, seguro y reproducible para identificar estafilococos coagulasa negativos responsables de mamitis en el ganado bovino.
|
|
Escherichia coli aislada a partir de mamitis bovinas invaden las células mamarias mediante vías endocíticas modificadas
Escherichia coli isolated from bovine mastitis invade mammary cells by a modified endocytic pathway
S. Passey, A. Bradley, H. Mellor
Vet Microb, 2008. Vol. 130 (1-2):151-164
El objetivo de este trabajo era profundizar en la patogénesis de la mamitis bovina provocada por E. coli y, concretamente, investigar las vías intracelulares utilizaras por E. coli en el curso de las mamitis bovinas.
Mediante microscopía confocal y marcadores fluorescentes de compartimentos endocíticos se comprobó in vitro que E. coli invadía las células primarias mamarias bovinas sin provocar cambios en el citoesqueleto celular de actina. Se observaron bacterias en el interior de compartimentos membranosos indicativas de un mecanismo de entrada endocítico. Las bacterias no se observaron en lisosomas ni en vacuolas autofágicas, lo que significa que la bacteria penetraba en la célula por medios diferentes a la degradación lisosomal.
Según los autores, sus observaciones sugieren la existencia de un nicho endosomal que protege a la bacteria y le permite eludir las respuestas inmunes generadas por el hospedador, dando lugar al establecimiento de un reservorio de la infección que en el futuro podría ser la causa de un nuevo episodio de mamitis clínica.
|
|
Efectos del ketoprofeno en la marcha de vacas lecheras con cojera
Analgesics Improve the Gait of Lame Dairy Cattle
F. C. Flower, M. Sedlbauer, E. Carter, M. A. G. von Keyserlingk, D. J. Sanderson and D. M. Weary
J. Dairy Sci. 2008. 91:3010-3014
El objetivo de este estudio era determinar qué características del paso están asociadas al dolor en situaciones de cojera. Para poder realizar este trabajo se llevaron a cabo tres pruebas en tres grupos de vacas Holstein (n=20; n=21; n=27) a las que se habían diagnosticado diferentes grados de cojera. Todos los animales recibieron una inyección de ketoprofeno, bien vía intramuscular (grupos 1 y 2), bien vía intravenosa (grupo 3) con dosis de 0; 0,3; 1,5 y 3,0 mg/kg p.v.
Se evaluaron, en una escala del 1 al 5, seis características del paso (lomo curvado, posición de los pasos, pasos asimétricos, flexión de la articulación, postura de la cabeza o reticencia a soportar peso). Cada prueba se dividió en tres fases (antes del tratamiento, durante el tratamiento y después del tratamiento), cada una con una duración de 3 días. Las inyecciones de ketoprofeno se aplicaron diariamente.
Los resultados mostraron que los efectos del ketoprofeno eran evidentes cuando la dosis era máxima, mostrando una mejora en la escala de 0,25±0,05. Aunque, no se observaron cambios evidentes en las diferentes características del paso, sí se detectó cierta interacción, sólo en el grupo 1, entre la dosis y las características simetría del paso y reticencia a cargar peso: se mejoró la simetría y hubo una mejor distribución del peso corporal con las dosis más elevadas de ketoprofeno.
Según los autores, estos resultados indican que el sistema de valoración numérico era más sensible que los diferentes atributos estudiados para evaluar los cambios en el paso asociados al dolor. En cuanto a la eficacia del ketoprofeno, sus efectos en el paso fueron reducidos, lo que era indicativo de que apenas aliviaba el dolor o de que las variaciones importantes de la puntuación eran resultado de otros factores distintos del dolor.
|
