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Detección de mamitis tempranas en la glándula mamaria bovina mediante citometría de flujo
Detection of mastitis in the bovine mammary gland by flow cytometry at early stages
C. Koess and J. Hamann
Journal of Dairy Research 2008. Vol. 75: 225-232
De acuerdo con la posibilidad que ofrece la citometría de flujo para identificar las diferentes poblaciones celulares de la leche, en este estudio se utilizó dicha técnica para determinar la existencia de mamitis subclínica en vacas lecheras que se encuentran en fases tempranas de infección.
Para ello era necesario identificar las principales poblaciones de leucocitos en los gráficos de puntos que se generan en la citometría de flujo (neutrófilos polimorfonucleares, linfocitos y macrófagos), y a partir de estas células, elaborar un método de pronóstico para la mamitis.
Se tomaron muestras de 15 vacas lecheras Holstein y se realizaron los consiguientes recuentos de células somáticas. Se extrajeron las células y se incubaron con diferentes anticuerpos monoclonales que se unían a las diferentes células y al propidium iodride, marcador de células viables. De este modo, se pudo localizar los diferentes tipos celulares en el gráfico obtenido e identificar los neutrófilos polimorfonucleares viables.
Los porcentajes de estas células viables pudieron determinarse mediante un sencillo procedimiento de centrifugación, incubación con propidium iodride y análisis citométrico, lo que indica que es posible la utilización de este método para establecer en qué fase de la inflamación se encuentra la mamitis, aun cuando los recuentos de células somáticas son reducidos en los diferentes cuarterones.
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Consecuencias de episodios repetidos de mamitis clínica genérica en la mortalidad y eliminación de vacas lecheras
Effects of Repeated Episodes of Generic Clinical Mastitis on Mortality and Culling in Dairy Cows
D. Bar, Y. T. Gröhn, G. Bennett, R. N. González, J. A. Hertl, H. F. Schulte, L. W. Tauer, F. L. Welcome and Y. H. Schukken
J. Dairy Sci. 2008. Vol. 91: 2196-2204
El objetivo de este trabajo era estimar de qué manera la mamitis clínica repercute en la mortalidad y desvieje de las vacas, consecuencias adicionales de la mamitis clínica aparte de las pérdidas provocadas por la reducción de la producción y los costes asociados a los tratamientos.
Se trabajó con la información de 16.145 lactaciones de 5 grandes explotaciones de alta producción. En ellas se registraron 3.036 de mamitis clínica, 758 casos de dos episodios de mamitis y 288 casos con tres episodios en un periodo de 10 meses posparto. Mediante estudios estadísticos que contemplaban varios parámetros entre ellos la repetición de mamitis, número de partos, fase de lactación y otras enfermedades se determinó el riesgo de mortalidad y desvieje en las vacas estudiadas.
Los resultados mostraron que la mortalidad aumentaba significativamente en todos los casos. Entre las vacas primíparas, el riesgo de morir o ser eliminada variaba según el número de episodios de mamitis sufridos, así el odds ratio era (intervalo de confianza del 95%): 5,6 (1,7-18,0), 23,3 (7,1-76,2) y 27,8 (3,7-209,9) para vacas con uno, dos o tres casos de mamitis clínica, respectivamente y entre las multíparas los resultados obtenidos fueron: 9,9 (7,4-13,2), 12,0 (8,0-18,0), y 11,5 (6,1-21,4). En consecuencia, la mamitis clínica aumentaba significativamente el riesgo de que una vaca fuera eliminada en un periodo de 2 meses tras un proceso mamítico.
Según los autores, estos resultados suponen una información adicional para los productores con respecto a la mortalidad y desvieje asociados a la mamitis clínica, que además pueden ser utilizados en análisis económicos con respecto a las opciones de manejo de esta patología.
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Estimación del coste de la mamitis clínica en vacas lecheras mediante la aplicación de modelos estadísticos dinámicos
The Cost of Generic Clinical Mastitis in Dairy Cows as Estimated by Using Dynamic Programming
D. Bar, L. W. Tauer, G. Bennett, R. N. González, J. A. Hertl, Y. H. Schukken, H. F. Schulte, F. L. Welcome and Y. T. Gröhn
J. Dairy Sci. 2008. Vol. 91:2205-2214
A partir de los datos de 5 rebaños de alta producción se estimó, mediante modelos estadísticos de optimización y simulación, los costes asociados a la mamitis clínica en vacas de alto rendimiento lechero.
Los resultados obtenidos pusieron de manifiesto que en estos rebaños el coste medio de tratamiento frente a mamitis clínica por vaca y año era de 45 euros. El coste medio por caso clínico era de 114 euros (73 euros consecuencia de las pérdidas de producción, 9 euros derivados del incremento de la mortalidad y 32 euros consecuencia de terapias asociadas).
El coste estimado de las mamitis clínicas dependía en gran manera de las características del animal, es decir, en vacas de las que se esperaba un retorno de la inversión elevado (animales jóvenes o de alta producción) la inversión en tratamientos era alta: 254 euros; mientras en animales en los que se había recomendado su sacrificio el coste era reducido: 2 euros.
Además, se observó que el coste de la mamitis estaba asociado al precio de la leche, si ésta subía un 20%, en la misma medida lo hacía el gasto y viceversa. Cuando los cambios afectaban a la tasa de gestaciones o en el coste de reposición en el mismo porcentaje, el coste asociado a la mamitis apenas variaba, sin embargo la situación inversa: modificaciones en la incidencia de la mamitis, sí repercutía en estos factores, y por lo tanto en la rentabilidad de la explotación.
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Comparación de la respuesta inmune innata frente a la infección mamaria por Escherichia coli en las razas Holstein y Jersey
Comparison of Holstein and Jersey Innate Immune Responses to Escherichia coli Intramammary Infection
D. D. Bannerman, A. C. W. Kauf, M. J. Paape, H. R. Springer and J. P. Goff
J. Dairy Sci. 2008. Vol. 91:2225-2235
Para conocer las causas por las que la raza Holstein mostraba en las encuestas una mayor prevalencia de mamitis y un mayor riesgo a la infección intramamaria que la raza Jersey, se realizó este trabajo en el que se compararon los mecanismos de la respuesta inmune innata de ambas razas.
El estudio se realizó con animales de las dos razas, en condiciones fisiológicas similares (igual fase de lactación, número de parto,…) y sometidas a un manejo parecido, se infectaron experimentalmente el mismo día con la misma cantidad de inóculo. Seguidamente, se registraron los parámetros de la respuesta inmune innata: eliminación bacteriana; cambios en la temperatura corporal; inducción de proteínas de fase aguda como el amiloide sérico A y la proteína de unión al lipopolisacárido; alteraciones en los recuentos de células blancas y somáticas y de la permeabilidad vascular; y por fin, inducción de las citoquinas IFN-γ, IL-1β, IL-8, IL-12 y el factor de necrosis tumoral-α.
Los resultados obtenidos mostraron que la respuesta inmune innata es similar, en general, para ambas razas, si bien, se observaron diferencias en el momento de inicio, cese y duración de las respuestas detectadas. No obstante, a pesar de dichas diferencias, la eliminación de la bacteria del tejido intramamario fue comparable entre las dos razas.
Según los autores, estos datos sugieren que la respuesta inmune innata de vacas Holstein y Jersey se conserva de manera significativa para la infección intramamaria por E. coli.
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Comportamiento en la ingesta de agua y predicción de su consumo en vacas lecheras en lactación
Drinking Behaviour of Lactating Dairy Cows and Prediction of Their Water Intake
V. Cardot, Y. Le Roux and S. Jurjanz
J. Dairy Sci. 2008. Vol. 91: 2257-2264
El objetivo del siguiente trabajo era conocer el comportamiento en la ingesta de agua en vacas lecheras en lactación y determinar los factores que intervienen en dicha ingesta.
Se monitorizó la conducta de 41 vacas en estabulación libre, alimentadas una vez al día con una ración mixta total a base de ensilado de maíz y concentrado (48% de materia seca) y ordeñadas 2 veces al día (producción 26,5±5,9 kg/d).
Las observaciones pusieron de manifiesto que la ingesta de agua era de 83,6±17,1 l/d, en 7,3±2,8 tomas (cada toma era de 12,9±5,0 litros). Prácticamente, tres cuartas partes de esta ingesta de agua, tenía lugar entre las 6:00 y las 19:00 horas; los picos de consumo tenían lugar durante las comidas y los ordeños; y más de un cuarto del consumo se producía dos horas después de cada ordeño. Aproximadamente, un 75% de los animales se acercaban al bebedero, al menos una vez, en las dos horas siguientes al ordeño de la tarde. Según los autores, este comportamiento podría variar con la evolución de la lactación, de manera que es necesario seguir trabajando en este sentido.
En cuanto a los factores con mayores repercusiones en el consumo de agua los autores los relacionan en la siguiente ecuación: Consumo de agua (l/d)= 1,53 x ingesta de materia seca (kg/d) + 1,33 x producción leche (kg/d) + 0,89 x contenido en materia seca (%) + 0,57 x temperatura mínima (ºC) – 0,30 x precipitaciones (mm/d) – 25,65. Siendo (R2= 0,45; n=41, n=1.837). Ecuación, que en opinión de los autores, coincide con otras propuestas por otros investigadores.
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Mecanismos celulares que regulan el recambio celular durante la lactación y el periodo seco en vacas lecheras
Cellular Mechanisms in Regulating Mammary Cell Turnover During Lactation and Dry Period in Dairy Cows
J. V. Nørgaard, P. K. Theil, M. T. Sørensen and K. Sejrsen
J. Dairy Sci. 2008. Vol. 91: 2319-2327
El objetivo de este estudio fue describir la expresión de genes que codifican proteínas implicadas en las diferentes vías de regulación de la proliferación, apoptosis, diferenciación y supervivencia de células mamarias y en la remodelación del tejido. Para ello se tomaron biopsias de la glándula mamaria de 10 vacas lecheras en 7 ocasiones durante el ciclo gestación-lactación, y se analizaron mediante técnicas de inmunohistoquímica y PCR en tiempo real.
Los resultados observados pusieron de manifiesto que la proliferación celular fue mayor durante el periodo seco y la apoptosis fue elevada al inicio del periodo seco y en la lactación temprana. En cuanto a la posibilidad de cambios periodo-dependientes entre las vías extrínsecas e intrínsecas que conducen a la apoptosis no se observaron indicios según ponen de manifiesto la expresión de ciertos genes correspondientes a Fas (miembro 6 de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral), ligando Fas, y caspasas 3, 8 y 9.
La expresión génica de la glutatión S-transferasa microsomal apenas varió, mientras sí lo hizo y de forma significativa la expresión del gen de las proteínas Bax y Bcl-2 durante el periodo seco y las primeras fases de la lactación, coincidiendo con un recambio celular elevado. La expresión de los genes de respuesta temprana c-Fos, c-Jun y c-Myc no se encontraron asociados a la proliferación celular ni a concentraciones plasmáticas del factor de crecimiento análogo a la insulina tipo I o de insulina. Por su parte, la expresión del gen potenciador de la cadena ligera κ del factor nuclear de las células-B (NFκB) y del inhibidor NFκB era mayor durante el periodo de periparto coincidiendo con una necesidad anticipada de factores para la supervivencia celular.
La expresión del ARN mensajero para los receptores 1 y 2 del factor transformador del crecimiento β (TGF-β) era mayor al inicio de la lactación, mientras TGF-β1 no varió significativamente durante el ciclo gestación-lactación. A pesar de que las observaciones realizadas con respecto al sistema TGF-β no coinciden con los resultados de otros trabajos, el modelo de expresión génica de este factor indica que tiene una función en la regulación de la apoptosis durante la lactación temprana.
La expresión del gen de transducción de señales y activador de la transcripción 5 (STAT5) era elevada durante el periodo de periparto, lo que sugiere que este gen estaría implicado en la regulación de la proliferación y diferenciación celular en la glándula mamaria. Por último, la expresión de los genes activador de plasminógeno tisular, el inhibidor del activador de plasminógeno-1, y la proteína de unión eran mayor al inicio de la lactación, lo que indica, según los autores, la participación del factor de crecimiento análogo a la insulina en la regulación de la apoptosis y remodelado del tejido mamario.
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Efectos patógeno-específicos de locus de rasgos cuantitativos que repercuten en la mamitis clínica y en los recuentos de células somáticas en ganado lechero de la raza Holstein
Pathogen-Specific Effects of Quantitative Trait Loci Affecting Clinical Mastitis and Somatic Cell Count in Danish Holstein Cattle
L. P. Sørensen, B. Guldbrandtsen, J. R. Thomasen and M. S. Lund
J. Dairy Sci. 2008. Vol. 91: 2493-2500
Los datos bacteriológicos de 5 patógenos causantes de mamitis en el ganado lechero danés (Streptococcus dysgalactiae, Escherichia coli, estafilococos coagulasa-negativos, Staphylococcus aureus, y Streptococcus uberis) se utilizaron para investigar la especificidad frente a patógeno de locus de rasgos cuantitativos (QTL) que repercuten en la puntuación de células somáticas y en la presentación de mamitis clínica en el primer (MC1), segundo (MC2) y tercer parto (MC3).
Se identificaron 2 (QTL) que afectaban a la puntuación de células somáticas con efectos patógeno específicos frente a S. aureus y E. coli. En el caso de los (QTL) que afectaban a la mamitis clínica los resultados obtenidos no pueden afirmarse con tanta seguridad. Para la MC1 se detectó un QTL específico frente a S. dysgalactiae y S. aureus; para la CM2 se identificó otro QTL frente a E. coli y para la MC3 se encontró un tercer QTL exclusivo frente a S. aureus. En ningún caso se encontró un locus específico frente a estafilococos coagulasa negativos o S. uberis.
Según los autores, estos resultados sugieren que hay QTL asociados a mamitis que muestran con gran probabilidad una elevada especificidad de patógeno. No obstante, deben interpretarse con precaución, ya que se trata de datos de campo y existen varios factores que podrían alterar los resultados obtenidos (periodo de toma de muestras, número de muestras y procedencia de las mismas).
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Rasgos alternativos del recuento de células somáticas como indicadores de mamitis en la selección genética
Alternative Somatic Cell Count Traits as Mastitis Indicators for Genetic Selection
Y. de Haas, W. Ouweltjes, J. ten Napel, J. J. Windig and G. de Jong
J. Dairy Sci. 2008. Vol. 91: 2501-2511
Para determinar qué rasgos de los recuentos de células somáticas pueden utilizarse para reducir la susceptibilidad genética a la mamitis clínica y subclínica se evaluaron tres tipos de rasgos (promedios de células somáticas en la lactación, resultados en los test diarios superiores a 150.000 cél. / ml y picos en los perfiles de recuentos de células) en dos grupos de datos (con diferentes registros de mamitis clínica). Adicionalmente, se estimaron los parámetros genéticos de estos rasgos y su correlación con la mamitis clínica.
Los resultados obtenidos mostraron que la heredabilidad de los rasgos para la mamitis era aproximadamente 0,03, mientras en el caso de los rasgos atribuidos a los recuentos de células somáticas, la heredabilidad se encontraba entre 0,01 y 0,13 dependiendo del rasgo estudiado. En cuanto a la correlación genética entre los rasgos de recuentos y la mamitis (clínica y subclínica), se encontraba entre 0,55 y 0,93 en el caso de mamitis clínica y entre 0,55 y 0,98 si el proceso era subclínico.
En el caso de los grupos estudiados, en el primero se detectó una alta correlación genética entre la mamitis clínica y la media de recuentos a los 250 días en leche (0,87) y entre el proceso subclínico y recuentos superiores a 150.000 cél. /ml en los test diarios (0,98). En el segundo grupo, se estimó una alta correlación entre la mamitis clínica y los picos de recuentos que se recuperaban con rapidez (0,93) y entre el proceso subclínico y la media de recuentos entre los días de lactación 151 a 400 (0,95).
Para ampliar la información al respecto, se estudiaron correlaciones genéticas parciales entre los rasgos de recuentos de células somáticas y la media de recuentos en lactación y éstas fueron reveladoras en unos casos para la mamitis clínica y en otros para el proceso subclínico. Este hecho significa, según los autores, que es preferible combinar los diferentes rasgos a utilizar un único parámetro relacionado con los recuentos para obtener un mayor éxito en la mejora de la salud de la ubre.
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Prácticas de manejo asociadas a la infección por Mycobacterium avium subespecie paratuberculosis y efectos de la infección en los rebaños lecheros
Management practices associated with Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis infection and the effects of the infection on dairy herds
F. J. Diéguez, I. Arnaiz, M. L. Sanjuán, M. J. Vilar, and E. Yus
The Veterinary Record 2008. Vol.162: 614-617
El estudio realizado en 101 rebaños seleccionados al azar pretendía conocer las relaciones entre el nivel de infección por Mycobacterium avium sub. Paratuberculosis (MAP) en los rebaños, las medidas de manejo aplicadas y los posibles indicadores de enfermedad como las tasas de mamitis o el estado reproductivo.
Los datos se recogieron mediante encuestas realizadas al personal de las explotaciones y a los veterinarios responsables de la misma. Adicionalmente, se tomaron muestras de sangre de todos los animales mayores de 1 año y se analizaron mediante la técnica de ELISA para detectar anticuerpos frente a Mycobacterium.
Las prácticas de manejo que se consideraron determinantes en cuanto a un riesgo mayor de infección fueron la utilización de calostro de vacas con un diagnóstico previo positivo a la bacteria y la reubicación prematura (antes de los 6 meses) de los terneros junto al ganado adulto. En cuanto a la seropositividad de los animales, se observó que estaba asociada a cambios en los recuentos de células somáticas en el tanque de leche y a la incidencia de mamitis y no se relacionaba con otros aspectos como el estado reproductivo.
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Protección de una vacuna mutada con la enterotoxina estafilocócica tipo C recombinante en vacas infectadas experimentalmente con Staphylococcus aureus aislados a partir de mamitis subclínicas en ganado lechero
Protective effects of recombinant staphylococcal enterotoxin type C mutant vaccine against experimental bovine infection by a strain of Staphylococcus aureus isolated from subclinical mastitis in dairy cattle
B.S. Chang, J.S. Moon, H.M. Kang, Y.I. Kim, H.K. Lee, J.D. Kim, B.S. Lee, H.C. Koo and Y.H. Park
Vaccine, 2008. Vol. 26 (17): 2081-2091
La falta de antibióticos efectivos frente a Staphylococcus aureus, principal agente etiológico de las mamitis bovinas, hace necesaria la búsqueda de otras alternativas para el tratamiento de estos procesos. Por esta razón, el objetivo de este trabajo fue conocer la eficacia protectora de una vacuna mutada con la enterotoxina C recombinante, un superantígeno de las cepas de S. aureus bovinas con poder inmunógeno.
Se realizaron dos grupos de 3 animales a los que se inoculó la bacteria por vía intramamaria. A las vacas de uno de los grupos se les aplicó la vacuna por vía intramuscular en tres dosis: el día 0, y a las 2 y 6 semanas posvacunación. El grupo restante de animales fue considerado grupo control.
A las 4 semanas tras la aplicación de la vacuna se realizó la prueba de ELISA específica para la enterotoxina C y se confirmó la presencia de títulos altos de anticuerpos frente a este antígeno en los animales vacunados. Los recuentos de células somáticas de las vacas inmunizadas permanecieron bajos, mientras los correspondientes a los animales control se incrementaron de forma significativa tras el desafío con la bacteria. El aislamiento del patógeno sólo fue posible en el 75% de los animales que no recibieron la vacuna.
En opinión de los autores, estos resultados indican que la vacuna mutada con la enterotoxina C recombinante protege eficazmente frente a las infecciones intramamarias causadas por S. aureus en vacas en lactación.
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