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Desarrollo de una prueba altamente sensible y específica para detectar Staphylococcus aureus en leche mamítica bovina
Development of a Highly Sensitive and Specific Assay to Detect Staphylococcus aureus in Bovine Mastitic Milk
H.U. Graber, M.G. Casey, J. Naskova, A. Steiner and W. Schaeren
J. Dairy Sci. 2007, Vol. 90: 4661-4669
El diagnóstico de las infecciones mamarias causadas por Staphylococcus aureus mediante pruebas bacteriológicas no siempre es satisfactorio. Para conseguir resultados fiables es necesario realizar muestreos repetidos que incrementan los costes considerablemente, sin embargo, la nueva prueba desarrollada en este trabajo parece ser una herramienta ideal.
El test desarrollado permite detectar de una manera altamente específica al patógeno S. aureus en muestras de leche, aún encontrándose en muy bajas concentraciones. La prueba se basa en una rápida preparación de las bacterias que se encuentran en la leche, seguida de una extracción y cuantificación del ADN mediante la técnica de PCR. La prueba se realiza tan sólo en 5 horas.
En cuanto a los resultados de éxito diagnóstico en muestras de leche clínica, la sensibilidad del análisis fue de 50,7 veces y 507 veces más alta que la bacteriología convencional con 100 y 10 μl, respectivamente. La especificidad fue del 100%. La prueba se caracterizó por una baja variabilidad intra e interanálisis, así como por una buena recuperación de S. aureus de la leche cruda, y demostró una alta correlación (R= 0,925) entre los recuentos en placa de agar y el método cuantitativo de PCR en todos los rangos de medida aplicados. Por último, el test reveló más resultados positivos que la bacteriología.
Sus propiedades favorables, lo hacen una importante herramienta de diagnóstico para detectar mamitis bovinas provocadas por este patógeno.
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Prueba sensible para la detección de Staphylococcus aureus en mamitis bovina basada en el crecimiento en caldos de cultivo y la técnica de PCR
Sensitive test for screening for Staphylococcus aureus in bovine mastitis by broth cultivation and PCR
N. Yamagishi, Y. Jinkawa, K. Omoe, S. Makino, and K. Oboshi
The Vet Rec 2007, Vol. 161:381-383
La prueba desarrollada y evaluada para detectar Staphylococcus aureus en muestras de leche de vacas que presentan mamitis consistía en la incubación de dichas muestras durante toda la noche en un caldo que contenía 7,5% de cloruro sódico y en la posterior amplificación del gen nuc mediante la técnica de PCR.
Los resultados mostraron que la prueba podía detectar concentraciones de S. aureus tan reducidas como la de 1 unidad formadora de colonias/ml de leche. Entre las 106 muestras recogidas de cada cuarterón de vacas en lactación y del tanque de leche de una explotación, se detectó la bacteria en nueve muestras mediante la técnica de PCR y sólo 3 mediante el cultivo microbiológico convencional.
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Efectos de episodios repetidos de mamitis clínica genérica en la producción de leche de vacas lecheras
Effect of Repeated Episodes of Generic Clinical Mastitis on Milk Yield in Dairy Cows
D. Bar, Y.T. Gröhn, G. Bennett, R.N. González, J.A. Hertl, H.F. Schulte, L.W. Tauer, F.L. Welcome and Y.H. Schukken
J. Dairy Sci. 2007, Vol. 90: 4643-4653
El objetivo de este trabajo era estimar las pérdidas asociadas a casos de mamitis clínicas recurrentes que ocurren dentro de una lactación y entre sucesivas lactaciones.
Se estudiaron 10.380 lactaciones en 5 explotaciones de alta producción. Para cuantificar la repercusión de la mamitis clínica y de otras variables control (prolificidad, semana de lactación, u otras patologías) en la producción láctea se aplicaron métodos estadísticos.
Un número elevado de vacas con mamitis clínica, antes de padecerla, tenían mayores producciones que sus compañeras sanas. La producción iniciaba su descenso después del diagnóstico; teniendo lugar la caída más importante de ésta en las primeras semanas (hasta 126 kg) y manteniéndose después constante durante los dos meses siguientes a la aparición del proceso clínico. Las vacas afectadas nunca recuperaban su producción potencial.
Las vacas en primera lactación reducían su producción, con respecto a la original, 164 kg en el primer episodio y 198 kg en el siguiente, durante el segundo mes tras el diagnóstico de mamitis; en las vacas más viejas, la reducción ascendía a 253 kg para el primer episodio, a 238 kg para el segundo, y a 216 kg para el tercero. Se estimó que el animal con 1 o más episodios de mamitis clínica en una lactación, producía en la siguiente 1,2 kg/día menos de leche que una vaca no afectada en la misma lactación (0,95 intervalo de confianza: 0,6 - 1,7).
Los resultados observados aportan a los ganaderos información aproximada del descenso en la producción de leche asociada a los casos de mamitis clínica, sin considerar el agente causal, permitiéndoles elaborar el consiguiente análisis económico.
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Cambios en la asociación entre la producción láctea y la edad al primer parto en vacas Holstein sometidas a un nivel de ambiente adecuado a la producción
Changes in the Association Between Milk Yield and Age at First Calving in Holstein Cows with Herd Environment Level for Milk Yield
R. Ruiz-Sánchez, R.W. Blake, H.M.A. Castro-Gámez, F. Sánchez, H.H. Montaldo and H. Castillo-Juárez
J. Dairy Sci. 2007, Vol. 90: 4830-4834
El objetivo de este estudio era valorar el efecto que ejerce la calidad del ambiente del rebaño en las relaciones genotípicas y fenotípicas de la producción láctea equivalente en vaca madura (EVM) y la edad al primer parto (EPP).
Se analizaron los datos de 248.230 vacas Holstein. Según la calidad del ambiente del rebaño era alta o baja, la heredabilidad de la edad al primer parto fue 0,33 ± 0,01 y 0,20 ± 0,01, respectivamente y 0,47± 0,01 en el total de datos que representan ambientes intermedios. La correlación entre los valores de reproducción predecibles en la edad al primer parto de los sementales para ambientes de alta o baja calidad fue 0,69. Las correlaciones genéticas entre la producción de leche (EVM) y la EPP fue -0,52 ± 0,02 y -0,31 ± 0,03, respectivamente para ambos tipos de ambiente y -0,44 ± 0,02 si se consideraban ambientes intermedios.
Si la selección se basaba en el total de datos, se esperaban respuestas correlacionadas con la edad al primer parto estimada como resultado de una ganancia genética de la producción de leche EVM de 1.000 kg (para ambientes del rebaño de calidad alta y baja fueron -26,1 y -15,3, respectivamente y -32,6 para el total de datos), así la mayor reducción en la edad al primer parto se producía con ambientes de rebaño intermedios.
Diferentes estimaciones de la heredabilidad de la edad al primer parto, la correlación entre los valores reproductivos de la EPP, así como los cambios en la correlación genética entre la producción de leche (EVM) y la EPP en los diferentes ambientes eran indicativos de que existía una interacción entre el genotipo y el ambiente.
Los autores consideran necesario interpretar con cuidado estos parámetros, ya que las relaciones genéticas son dinámicas, especialmente en poblaciones sobre las que se efectúa una selección. Las relaciones actuales pueden ser diferentes a las observadas durante el periodo del estudio (1987-1994). Considerando esta posibilidad, los métodos y observaciones realizadas en este estudio aportan información relativa a la complejidad de la asociación genética y las interacciones genotipo x ambiente entre la EPP y la producción láctea (EVM).
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Efectos de la estabulación, el parto y el cambio de dieta en la bioquímica y biomecánica de las estructuras de apoyo de la pezuña en novillas lecheras
Effects of housing, parturition and diet change on the biochemistry and biomechanics of the support structures of the hoof of dairy heifers
L. Knott, J.F. Tarlton, H. Craft and A.J.F. Webster
The Veterinary Journal 2007, Vol. 174 (2): 277-287
En este trabajo se investigaron los efectos de la estabulación, la dieta y el parto en la bioquímica, biomecánica y patología de las pezuñas en novillas no fecundadas, gestantes y en lactación. Se valoraron los siguientes parámetros: fuerza y laxitud, morfología laminar, bioquímica del tejido conjuntivo y lesiones en la suela.
Aunque ningún animal mostraba cojera clínica, la gravedad de las lesiones en la suela eran significativamente mayores en las novillas estabuladas en cubículos, que las que se encontraban en parques de paja; y en novillas en lactación o gestantes frente a las novillas no fecundadas aún. La estabulación en cubículos y los partos tenían efectos aditivos y aumentaban el metabolismo del tejido conjuntivo, alterando su composición. Ambos empeoraban, de forma parecida, la resistencia biomecánica de la pezuña.
Los resultados indican que el parto y la lactación provocan cambios no inflamatorios en el tejido conjuntivo que afectan negativamente la resistencia de la pezuña al estrés asociado con una estabulación en peores condiciones. Este “efecto parto” parece no estar relacionado con cambios en la dieta y ser relativamente breve en el tiempo, no obstante, puede agravarse si las condiciones de estabulación empeoran. En consecuencia, las cojeras en novillas podrían ser reducidas de manera significativa mejorando el manejo cuando el parto se aproxima.
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Determinación objetiva del dolor en la pezuña y su relación con la valoración del movimiento de las extremidades en el vacuno lechero
Objective Determination of Claw Pain and Its Relationship to Limb Locomotion Score in Dairy Cattle
R.M. Dyer, N.K. Neerchal, U.Tasch, Y. Wu, P. Dyer and P.G. Rajkondawar
J. Dairy Sci. 2007, Vol. 90: 4592-4602
Para saber si el dolor de la pezuña podía ser medido de manera objetiva se realizaron pruebas de valoración del dolor y de movimiento a 263 vacas Holstein procedentes de dos rebaños comerciales. Se midió el dolor de la pezuña mediante tenazas equipadas con un manómetro, y el dolor en tejidos blandos se determinó mediante un algómetro. Se estableció como dolor máximo el registrado cuando el animal retiraba la pata al comprimir la pezuña o el tejido blando.
Los resultados mostraron que la frecuencia y la magnitud del dolor repercutían en la valoración del movimiento de la extremidad ipsilateral para las pezuñas laterales pero no para las mediales. El índice de dolor en la pezuña lateral en vacas con puntuaciones de 1 a 5 de movimiento decrecía de 0,95 a 0,4; mientras en la medial se mantenía próxima a 1. En cuanto a la magnitud del índice de dolor en las pezuñas lesionadas era similar en la medial y en la lateral (0,73 frente a 0,64).
La magnitud y frecuencia del dolor en las pezuñas de las extremidades posteriores apenas se encontraba afectado por la puntuación de movimiento o el dolor en la pezuña contralateral. Las extremidades no lesionadas con pezuñas que mostraban dolor tenían un índice de 0,72±0,02 indicativo de menor dolor que en extremidades lesionadas (0,61±0,02).
Los resultados mostraron que el dolor en las pezuñas laterales estaba relacionado con la puntuación de movimiento obtenida en la extremidad ipsilateral y que el dolor subclínico era relativamente común. Los autores concluyen que la medición objetiva del dolor podría aportar, un procedimiento de medición más fiable y continuo de los casos clínicos de cojera.
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Concordancia entre la producción láctea relativa estimada para los 305 días de lactación y la producción real
Agreement of Predicted 305-Day Milk Yields Relative to Actual 305-Day Milk Weight Yields
M. A. Quist, S. J. LeBlanc, K.J. Hand, D. Lazenby, F. Miglior and D.F. Kelton
J. Dairy Sci. 2007, Vol. 90: 4684-4692
El objetivo de este trabajo era, por una parte, comparar un modelo de múltiples rasgos para predecir la producción de la lactación de 305 días con los resultados obtenidos por los medidores de leche automáticos y, por otra, analizar la precisión de la identificación electrónica.
La producción de leche y sus componentes se calculaban utilizando el peso de la leche y las muestras recogidas durante un año de vacas procedentes de 20 explotaciones canadienses con sistemas de identificación electrónica en la sala de ordeño. En total se utilizaron los datos de 10.175 análisis diarios de 1.103 vacas con lactación completa (305 días). Dichos datos se introdujeron en el modelo informático de múltiples rasgos para predecir las producciones. Los análisis se agruparon en lactación primera, segunda, tercera y posterior, y dentro de cada grupo los días en leche se clasificaron en tres fases (5 a 60, 61 a 120 y 120 a 305 días). Para comparar la suma de los 305 días de la producción diaria con el modelo de predicción se aplicó un análisis de concordancia en el que se introdujeron los datos obtenidos diariamente durante la lactación.
Los resultados indicaron que el modelo de predicción de múltiples rasgos sobrestimaba las producciones de la lactación en todos los grupos, encontrándose entre 310 y 1.552 kg en la primera lactación, entre 1.640 y 2.000 kg en la segunda y entre 567 y 1.476 kg en la tercera y posteriores.
En lo referente a los sistemas de identificación, se verificó que el número que aparecía en la sala de ordeño correspondía al que la vaca tenía en su crotal, y el resultado fue que en dos de 4 explotaciones no hubo errores, y en otra el número de fallos fue muy reducido (3/80), lo que indicaba que los sistemas de identificación electrónica utilizados eran de gran precisión.
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Asociación entre las características del rebaño y la eficiencia reproductiva en rebaños lecheros
Associations Between Herd Characteristics and Reproductive Efficiency in Dairy Herds
E. Löf, H. Gustafsson and U. Emanuelson
J. Dairy Sci. 2007, Vol. 90: 4897-4907
La eficiencia reproductiva está reduciéndose mundialmente en las explotaciones lecheras a medida que cambian los métodos de manejo, por está razón, el objetivo de este trabajo era investigar en qué medida se encuentran asociadas las características del rebaño a sus resultados reproductivos. Para ello, se evaluaron los parámetros reproductivos de 2.728 rebaños suecos con más de 45 animales con los siguientes resultados:
Los rebaños más grandes tenían periodos parto a la 1ª inseminación artificial (IA) más cortos pero con un mayor número de inseminaciones que los pequeños, mientras éstos últimos tenían una mayor tasa de eliminación. Los rebaños con producciones reducidas de leche tenían intervalos entre partos y periodos parto a la 1ª y última IA más largos y mayores tasas de eliminación que rebaños de alta producción, mientras éstos tenían asociado un mayor número de IA que los de baja producción. Explotaciones con sistemas automáticos de ordeño tenían intervalos entre partos menores, periodos parto a la 1ª y última IA más cortos y tasas de eliminación inferiores a los observados en explotaciones con sistemas de ordeño convencional.
Los rebaños que tenían un servicio de asesoría en alimentación tenían intervalos entre partos y de parto a la 1ª y última IA más cortos con unas mayores tasas de eliminación. Los rebaños que recibían una ración mixta total tenían mayores intervalos entre partos y periodos parto a la 1ª y última inseminación que los rebaños en los que no se administraba. Las explotaciones ecológicas tenían intervalos entre partos más cortos y periodos parto a la 1ª y última IA más cortos que las convencionales.
Por último, se observó que las explotaciones en las que se había realizado la IA por operarios propios tenían mayores intervalos entre partos y periodos parto a la 1ª y última inseminación.
El estudio mostró numerosas asociaciones entre las características del rebaño y el rendimiento reproductivo del mismo. Según los resultados obtenidos, los autores sugieren que cuando se quiera mejorar los índices reproductivos de una explotación, los recursos del servicio asesor deben dirigirse a aquellas características del rebaño fácilmente influenciables como son la ración mixta total y la inseminación realizada por operarios de la misma explotación.
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Modelos de resistencia antimicrobiana fenotípica y genotípica de Escherichia coli aislado en mamitis en vacas lecheras
Phenotypic and genotypic antimicrobial resistance patterns of Escherichia coli isolated from dairy cows with mastitis
V. Srinivasan, B.E. Gillespie, M.J. Lewis, L.T. Nguyen, S.I. Headrick, Y.H. Schukken and S.P. Oliver
Vet Microbiol 2007, Vol. 124 (3-4): 319-328
En este artículo se evaluó la susceptibilidad a 26 antimicrobianos utilizados en medicina veterinaria y humana y la prevalencia de genes de resistencia antimicrobiana de Escherichia coli aislada a partir de muestras de leche de vacas con mamitis.
Entre 135 aislamientos de E. coli, las pruebas de eletroforesis revelaron 85 patrones genéticos diferentes. Todas las cepas fueron resistentes a dos o más antimicrobianos en combinaciones diferentes. La mayor parte de éstas fueron resistentes a los fármacos utilizados en veterinaria, incluida la ampicilina (98,4%, ≥32 μg/ml) y un número elevado lo fue a la estreptomicina (40,3%; ≥64 μg/ml), al sulfisoxazol (34,1%; ≥512 μg/ml), y a la tetraciclina (24,8%; ≥16 μg/ml).
La mayor parte de las cepas de E. coli mostraron resistencia a antimicrobianos utilizados en medicina humana, incluido el aztreonam (97,7%, ≥32 μg/ml) y el cefaclor (89,9%; 32 μg/ml). Otras cepas fueron resistentes a la nitrofurantoína (38%; ≥128 μg/ml), cefuroxima (22,5%; ≥32 μg/ml) y la fosfomicina (17,8%; ≥256 μg/ml). Sólo se observó sensibilidad a la ciprofloxacina y a la cinoxacina. En cuanto a los genes de resistencia, esta característica estaba ligada a la presencia de genes que actuaban de forma individual o en asociación con otros alelos según la cepa aislada.
Los resultados ponen de manifiesto que E. coli procedentes de vacas con mamitis eran genotípicamente diferentes, resistentes a un amplio abanico de antimicrobianos y portadoras de múltiples genes de resistencia combinados de forma diferente. Estos resultados sugieren que las cepas aisladas pueden ser un reservorio de resistencia a fármacos y podrían contribuir a la diseminación de resistencias a antimicrobianos a otras bacterias patógenas o comensales que se encuentran en el entorno de la explotación lechera.
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Influencia de la selección del antibiótico en la composición genética de las poblaciones de Escherichia coli procedentes de explotaciones lecheras convencionales y ecológicas
Influence of Antibiotic Selection on Genetic Composition of Escherichia coli Populations from Conventional and Organic Dairy Farms
S.T. Walk, J.M. Mladonicky, J.A. Middleton, A.J. Heidt, J.R. Cunningham, P. Bartlett, K. Sato and T.S. Whittam
Appl Environ Microbiol 2007, Vol. 73 (19): 5982-5989
El objetivo de este trabajo fue conocer qué procesos subyacen a la aparición y diseminación de resistencias y en la reversibilidad de resistencias cuando la presión selectiva sobre un antibiótico se elimina.
Mediante un modelo estadístico se valoró la asociación entre el tipo de explotación (convencional frente a ecológica), la edad del ganado (terneros frente a vacas), el fenotipo bacteriano (resistente frente a sensible), y la composición genética de 678 cepas de Escherichia coli (E. coli Colección de referencia [ECOR] filogrupos A, B1, B2, o D) resistentes o sensibles aisladas en 60 explotaciones lecheras (30 ecológicas y 30 convencionales).
El análisis realizado aportó evidencias de resistencia clonal a la ampicilina y de transferencia genética de resistencias (frente a la tetraciclina; gen Tetr), estimando una tasa de modificación en la composición genética inducida por el cambio de explotación, de convencional a ecológica, en un plazo de tiempo de 8 años (intervalo de 3 a 15 años) y descubierta una asociación significativa entre la reducida resistencia a múltiples fármacos, explotaciones ecológicas, y cepas del filogrupo numéricamente dominante B1.
Los datos obtenidos sugieren que las prácticas de manejo aplicadas en las explotaciones ecológicas no sólo cambian la frecuencia de las cepas resistentes, sino que también repercuten en la composición genética de las poblaciones globales de E. coli residentes. Por otra parte, los resultados apoyan la hipótesis de que la prevalencia actual de los locus Tetr en las explotaciones lecheras no se encuentra relacionado con el uso de tetraciclinas.
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