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Obtención de ganado resistente a las enfermedades mediante ingeniería genética
Engineering disease resistant cattle.
Donovan D.M., Kerr D.E., Wall R.J.
Transgenic Res. 2005 Oct;14(5):563-7.
Las infecciones de la glándula mamaria cuestan a la industria de EE. UU. aproximadamente 2.000 millones de dólares anuales y tienen un gasto similar en Europa. En ausencia de tratamientos selectivos o estrategias de cría para aumentar la resistencia a la mastitis, se han creado vacas lecheras transgénicas que expresan lisostafina en su epitelio mamario y secretan este péptido antimicrobiano en la leche. Staphylococcus aureus, principal patógeno causante de la mastitis, es muy sensible a la lisostafina. El ganado transgénico es resistente a S. aureus y su leche mata a la bacteria (dependiendo de la dosis). Este primer paso en la protección del ganado frente a la mastitis continuará con la introducción de otros genes relacionados con la resistencia frente a otros organismos causantes de mastitis, evitando la alteración nutricional de la leche. Se podrían necesitar construcciones multicistrónicas para conseguir estos objetivos, además de otras estrategias relacionadas con el ARNi (ARN de interferencia). Este trabajo demuestra la posibilidad de usar la tecnología transgénica para resolver los problemas sanitarios en las especies de animales de producción.
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Cómo afecta el estado sanitario del cuarterón, el intervalo de ordeño y el momento del muestreo durante el ordeño en las concentraciones de los constituyentes de la leche
Quarter Health, Milking Interval, and Sampling Time During Milking Affect the Concentration of Milk Constituents.
N. I. Nielsen, T. Larsen, M. Bjerring, K. L. Ingvartsen
J. Dairy Sci. 88:3186-3200
Se utilizaron 11 vacas Holstein danesas para examinar los efectos del estado sanitario de un cuarterón (sano frente a no sano), los intervalos de ordeño (12 horas frente a 6) y tiempo de muestreo durante el ordeño sobre la concentración de 8 constituyentes de la leche [acetona, b-hidroxibutirato (BHBA), N-acetil-b-D-glucosaminidasa (NAGasa), recuento de células somáticas (RCS), urea, grasa, proteína y lactosa]. El criterio de selección utilizado fue que cada vaca debería tener 2 o 3 cuarterones sanos y 1 o 2 enfermos.
La primera leche fue recogida antes de colocar las pezoneras de la máquina de ordeño, y las muestras posteriores de leche se recogieron automáticamente de cada cuarterón cada 45 segundos durante el ordeño. Al comparar con la leche de los cuarterones sanos, la leche de los cuarterones no sanos tuvo una mayor concentración de BHBA, NAGasa, RCS y proteína durante el ordeño completo, mientras que la urea apareció más alta en la última parte del proceso de ordeño. Los cuarterones sanos tuvieron un contenido más alto de acetona y lactosa durante el ordeño completo, mientras que la grasa fue más alta en la primera parte del proceso. Cuando las vacas fueron ordeñadas a intervalos de 6 horas, todos los constituyentes de la leche excepto lactosa y proteína fueron más altos durante el ordeño completo (NAGasa, RCS y urea) o una parte de él (acetona, BHBA y grasa) comparado con las vacas ordeñadas a intervalos de 12 horas. La lactosa presentó niveles más altos en la primera parte de la lactación en los intervalos de 12 horas comparado con el intervalo de 6 horas, mientras que la proteína no se vio afectada por el intervalo de ordeño. El b-hidroxibutirato, la NAGasa, el RCS y la grasa aumentaron durante el proceso de ordeño, mientras que la acetona, urea, proteína y lactosa disminuyeron. La primera leche recogida fue marcadamente diferente en todos sus constituyentes, excepto la acetona, y no debería usarse como muestra representativa de la leche para obtener el nivel real de sus constituyentes. Se deberían tener en cuenta todos estos hallazgos si estos constituyentes se van a analizar en un sistema de manejo en línea.
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Vigilancia de Escherichia coli O157 en la producción de leche
In-line milk filter analysis: Escherichia coli O157 surveillance of milk production holdings.
Murphy BP, Murphy M, Buckley JF, Gilroy D, Rowe MT, McCleery D, Fanning S.
Int J Hyg Environ Health. 2005;208(5):407-13.
Escherichia coli O157 es el principal agente patógeno que se transmite a través del alimento. Los bóvidos son reservorios de estos organismos y representan una fuente importante desde donde pueden entrar en la cadena alimenticia. Los productos alimenticios derivados de estos animales son vehículos apropiados y son, a menudo, puntos focales de infección. Como estrategia útil para proporcionar un control a nivel de rebaño e investigar la presencia de este patógeno, se analizaron en una población de ganado lechero irlandés, filtros de leche de 97 granjas mediante cultivo convencional y otros métodos. Se evaluaron 536 filtros de leche en un periodo de 2 años. Los filtros de 12 de las 97 granjas (12%) contenían E. coli O157. Se recogieron 16 organismos E. coli O157 verocitotoxigénico y se caracterizaron detalladamente. Las familias propietarias de las granjas consumían leche cruda de sus respectivos rebaños. Se estudió en este trabajo el riesgo potencial para la salud pública asociado a la detección de E. coli O157 y el consumo local de leche cruda.
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Asociación entre tasas de higiene y recuentos de células somáticas en el ganado lechero
Association between hygiene scores and somatic cell scores in dairy cattle.
Reneau J.K., Seykora A.J., Heins B.J., Endres M.I., Farnsworth R.J., Bey R.F.
J Am Vet Med Assoc. 2005 Oct 15;227(8):1297-301.
OBJETIVO: desarrollar un sistema simple para puntuar la higiene en el ganado vacuno y determinar si esta puntación está asociada a los recuentos individuales de células somáticas (RCSs).
DISEÑO: estudio observacional. ANIMALES: 1.191 vacas. PROCEDIMIENTO: con la ayuda de una tabla se asignaron puntuaciones de higiene desde 1 (limpio) a 5 (sucio) en 5 áreas corporales: cola, muslo (zona lateral), abdomen (zona ventral), ubre y extremidades posteriores (porción inferior). Para determinar coincidencia, la puntuación se asignó a 75 vacas dos veces mediante 4 evaluadores experimentados. Para determinar la exactitud y facilidad de uso, las puntuaciones de higiene asignadas por 14 estudiantes a 23 vacas fueron comparadas con puntuaciones asignadas por 2 miembros de la Facultad de Veterinaria. Para determinar la asociación a los RCSs, las puntuaciones de higiene fueron asignadas por un observador único a cada una de las 1.093 vacas.
RESULTADOS: los coeficientes de correlación media para la puntuación de la higiene asignada dos veces por 4 evaluadores expertos fueron mayores o igual a 0,884, lo que indica alta coincidencia. Los estudiantes señalaron que el sistema de puntuación fue fácil de usar y el coeficiente de correlación media para los estudiantes y miembros de la facultad fue de 0,804. Las puntuaciones de la higiene de la cola, muslo y abdomen no presentaron una asociación significativa con el RCS. Sin embargo, la puntuación de higiene para la ubre y miembros posteriores (poción inferior) y el complejo ubre-miembros posteriores se asoció significativamente al RCS, con aumentos del RCS conforme aumentaba la puntuación.
CONCLUSIONES E IMPORTANCIA CLÍNICA: los resultados sugieren que el sistema de puntuación de higiene fue repetible, exacto y fácil de realizar. Sin embargo, sólo la puntuación de la higiene para las ubres y los miembros posteriores y la puntuación para el complejo ubre-miembros posteriores tuvo una asociación significativa con el RCS.
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Respuesta inmune innata bovina durante la mastitis inducida experimentalmente con Pseudomonas aeruginosa
The bovine innate immune response during experimentally-induced Pseudomonas aeruginosa mastitis.
Bannerman D.D., Chockalingam A., Paape M.J., Hope J.C.
Vet Immunol Immunopathol. 2005 Sep 15;107(3-4):201-15.
Casi la mitad de todos los casos clínicos de mastitis están causados por bacterias Gram negativas. Entre estas bacterias, la infección intramamaria por Pseudomonas aeruginosa es una de las más refractarias a la terapia antibiótica. La capacidad para reconocer el peligro potencial de los patógenos y la inducción de una respuesta inicial proinflamatoria son componentes críticos de la inmunidad innata del hospedador. Aunque la respuesta inmune innata a otros patógenos Gram negativos causantes de mastitis como Escherichia coli ha sido bien caracterizada, muy poco se conoce acerca de la respuesta frente a otras bacterias Gram negativas, incluida P. auruginosa. El objetivo de este estudio fue caracterizar la respuesta inmune innata bovina sistémica y localizada frente a la infección intramamaria de P. aeruginosa.
Se desafiaron los cuarterones contralaterales de 10 vacas Holstein en mitad de la lactación con solución salina o con una solución de P. aeruginosa. Tras el establecimiento de la infección, se recogieron muestras de leche y se analizaron para observar los cambios en las concentraciones de citoquina y factor del crecimiento, activación del complemento y cambios en los niveles de CD14 (receptor de monocitos) solubles (sCD14), lipopolisacáridos (LPS) unidos a proteínas (LBP) y dos moléculas accesorias relacionadas en el reconocimiento por parte del hospedador de las bacterias Gram negativas. Fueron evidentes los aumentos iniciales en el recuento de células somáticas en leche a las 12 horas del desafío experimental y permanecieron elevadas durante 3 o más semanas. El aumento de la permeabilidad de la vascularización de la glándula mamaria, como se evidenció por los elevados niveles de BSA en leche, fue inicialmente observado 20 horas posinfección y persistió durante 2 semanas. A las 32 horas del desafío, aumentaron los niveles de IL-8, TNF-a, IL-10 e IL-12, sin embargo, los elevados niveles de estas citoquinas no fueron sostenidos durante periodos de más de 24 horas. Por el contrario, elevaciones de IL-1b, IFN-g, TGF-a, TGF-b1, TGF-b2, sCD14, LBP y factor 5 del complemento activado (C5a) fueron mantenidas durante periodos de más de 48 horas. Los cambios sistémicos se caracterizaron por un aumento de la temperatura corporal, una inducción de la síntesis de proteínas de fase aguda y un transitorio descenso del nivel de neutrófilos y linfocitos en circulación.
Estos datos muestran la capacidad de la glándula mamaria para incrementar una respuesta inmune innata frente a P. aeruginosa que se caracteriza por la inducción de las citoquinas proinflamatorias, la activación del complemento y el aumento de los niveles de las moléculas accesorias relacionadas con el reconocimiento bacteriano de los agentes Gram negativos.
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Aislamiento de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map) de gatos salvajes en granjas lecheras con ganado infectado con Map
Isolation of Mycobacterium avium subsp paratuberculosis (Map) from Feral Cats on a Dairy Farm with Map-infected Cattle.
Palmer M.V., Stoffregen W.C., Carpenter J.G., Stabel J.R.
J Wildl Dis. 2005 Jul;41(3):629-35.
La paratuberculosis es una enfermedad importante desde el punto de vista económico del ganado lechero causada por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map). El papel de los animales no rumiantes y no domésticos en la epidemiología de la paratuberculosis que afecta al ganado no es clara.
Se examinaron los animales no rumiantes y no domésticos para estudiar la presencia de Map, y se recogieron 25 gatos salvajes, 9 ratones (especies desconocidas), 8 conejos (Sylvilagus floridanus), 6 mapaches (Procyon lotor) y 3 zarigüeyas (Didelphys virginiana) de las granjas lecheras con ganado infectado por Map.
Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis fue aislado de los nódulos linfáticos mesentéricos de 7 de 25 (28%) gatos salvajes. El cultivo del tejido del íleon dio resultado positivo en 3 de esos 7 gatos, y también se realizó un aislamiento positivo de Map a partir del íleon de uno de los 9 (11%) ratones. Las muestras de tejido de otras especies fueron negativas en el cultivo de Map; no se observaron en ningún animal lesiones microscópicas coincidentes con paratuberculosis. El análisis de los polimorfismos de los aislamientos a partir de gatos y ganado lechero sugirió una transmisión interespecie. Los medios por los cuales tiene lugar la transmisión interespecie podrían ser la ingestión de heces contaminadas con Map, la leche de desecho o la ingestión de presas infectadas. No fue evaluada la eliminación de Map de gatos infectados. Es necesaria una mayor investigación sobre el papel epidemiológico de los gatos salvajes infectados con Map en las granjas lecheras.
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Efectos de la paratuberculosis en el sacrificio, producción y calidad de leche en los rebaños lecheros
Effect of paratuberculosis on culling, milk production, and milk quality in dairy herds.
Hendrick S.H., Kelton D.F., Leslie K.E., Lissemore K.D., Archambault M., Duffield T.F.
J Am Vet Med Assoc. 2005 Oct 15;227(8):1302-8.
OBJETIVO: determinar el efecto de la paratuberculosis en el sacrificio selectivo, producción y calidad de la leche en los rebaños lecheros infectados.
DISEÑO: estudio seccional cruzado.
ANIMALES: 689 vacas lecheras en lactación de 9 rebaños.
PROCEDIMIENTOS: se obtuvieron muestras de leche, sangre y heces de todas las vacas. Las muestras fecales fueron cultivadas para aislar micobacterias. Las muestras de suero fueron testadas mediante ELISA para buscar anticuerpos frente a Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis, y las muestras de leche conservadas fueron analizadas con ELISA buscando anticuerpos frente a M. paratuberculosis.
RESULTADOS: las vacas con resultados positivos de cultivos bacteriológicos de heces y ELISA de leche produjeron menos leche, grasa y proteína que las compañeras del rebaño con resultados negativos. No se detectaron diferencias en la leche a los 305 días o en la producción de grasa en vacas con resultados ELISA positivos del suero comparado con vacas seronegativas. Los análisis de supervivencia revelaron que las vacas con resultados positivos en cada uno de los tests presentaban un mayor riesgo de ser sacrificadas que las vacas con resultados negativos. El estado de paratuberculosis no se asoció al recuento de células somáticas.
CONCLUSIONES Y RELEVANCIA CLÍNICA: los resultados sugieren que en los 9 rebaños en este estudio, la paratuberculosis disminuyó significativamente la producción de leche y la longevidad de la vaca.
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Ácidos grasos no esterificados (NEFA) en ganado lechero
Non esterified fatty acids (NEFA) in dairy cattle.
Adewuyi A.A., Gruys E., van Eerdenburg F.J.
Vet Q. 2005 Sep;27(3):117-26.
El objetivo de este trabajo fue revisar la bibliografía en relación a las elevadas concentraciones sanguíneas de ácidos grasos no esterificados (NEFA) antes y después del parto en las vacas lecheras de alta producción. Destacan los factores que influyen en la producción de NEFA en suero y su circulación antes y después del parto, tales como la adaptación de nutrientes a las necesidades fetales, la instauración de la lactogénesis, el estrés del parto y numerosos cambios en el estado fisiológico, metabólico y endocrino para que se desarrolle el parto y la lactogénesis. Se estudió el papel de NEFA en el hígado y tejidos periféricos y sus efectos tóxicos. Los mecanismos fisiológicos de la vaca para prevenir o disminuir los altos valores de NEFA en suero y las intervenciones preventivas y terapéuticas para aumentar estos mecanismos se clasifican en antídotos naturales y artificiales respectivamente. Los sistemas de alimentación durante el periodo seco y el ejercicio diario o la actividad del paseo podrían quemar el exceso de NEFA por medio de la b-oxidación en el músculo y se consideran antídotos muy útiles en el metabolismo de NEFA. Esto minimizará la acumulación de lípidos en el hígado durante la primera fase de la lactación y aliviará los efectos negativos de NEFA en plasma conduciendo a una salud metabólica óptima y a una mejor productividad de las vacas lecheras.
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El equilibrio entre caseínas y proteínas del suero en leche de vaca determina su capacidad alergénica
The Balance Between Caseins and Whey Proteins in Cow’s Milk Determines its Allergenicity
F. Lara-Villoslada, M. Olivares, J. Xaus
J. Dairy Sci. 88:1654-1660. 2005
La alergia a la leche de vaca es bastante común en los primeros años de la vida del hombre. La composición de las proteínas juega un importante papel en esta patología, particularmente la proporción proteína del suero/caseína. La leche de diversas especies tiene diferente capacidad de sensibilización aunque sus fuentes proteicas sean bastante similares. Así, el objetivo de este trabajo fue comparar la alergenicidad de la leche de vaca y de la leche con una proporción modificada de caseína y proteínas séricas en un modelo murino de atopia. 24 ratones fueron sensibilizados oralmente con leche de vaca o leche modificada con una proporción de proteína sérica/caseína de 40:60. Durante el periodo de sensibilización, el número de ratones que sufrieron diarrea fue significativamente más alto en el grupo sensibilizado con leche de vaca que en el grupo sensibilizado con leche modificada. Una vez los ratones fueron sacrificados, los niveles de histamina en plasma se mostraron significativamente más altos en los ratones sensibilizados con leche de vaca. Además, las proteínas de leche de vaca indujeron una mayor respuesta linfocitaria en los ratones sensibilizados con leche normal, presentando un aumento significativo de la tasa de proliferación celular específica.
Estos resultados sugieren que el equilibrio entre caseína y proteínas séricas juega un importante papel en la capacidad de sensibilización de la leche de vaca, y su modificación podría ser un camino para reducir este tipo de alergia.
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Identificación de la glucoproteína ácida bovina alfa-1 en el calostro y en la leche
Identification of the bovine alpha1-acid glycoprotein in colostrum and milk.
Ceciliani F., Pocacqua V., Provasi E., Comunian C., Bertolini A., Bronzo V., Moroni P., Sartorelli P.
Vet Res. 2005 Sep-Dec;36(5-6):735-46.
La glucoproteína ácida alfa-1 (AGP) es una proteína inmunomoduladora expresada por los hepatocitos en respuesta a la reacción sistémica siguiente al daño tisular causado por la inflamación, la infección o el trauma. Este trabajo presenta la detección de la AGP bovina (boAGP) en las secreciones mamarias (calostro y leche) y tejido de la glándula mamaria. La AGP bovina fue detectada mediante Western blotting en todas las muestras analizadas, y cuantificada en el calostro, 162 (+/- 63,7) mg/ml y 114,5 (+/- 67,8) mg/ml durante las primeras 12 y 24 horas respectivamente. En leche madura, se observó el descenso de la concentración de boAGP mediante la técnica de inmunodifusión radial (RID). La concentración de boAGP en leche madura fue semicuantificada utilizando un procedimiento cromatográfico que permitió determinar la concentración de la proteína. La presencia de AGP en la leche de vaca se confirmó mediante la realización de análisis de secuencia interna seguidos de la purificación y la homogenización de la proteína. La concentración de AGP en la leche de vaca con un recuento de células somáticas bajo (RCS<250.000) fue muy similar a aquella de la leche de vaca con un alto recuento (RCS>250.000). Para investigar el origen de AGP en leche de vaca, se llevó a cabo un estudio del ARNm de las células somáticas y tejido de la glándula mamaria: la expresión del ARNm del gen boAGP fue detectada en el tejido de la glándula mamaria, pero no en las células somáticas. Finalmente, la secuencia de ADN complementario (ADNc) de boAGP fue determinada y presentada.
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